医学论文
全自动血细胞分析仪及迈瑞配套试剂
时间:2022-07-08 21:38 所属分类:医学论文 点击次数:
乙二胺四乙酸(EDTA)能与血液中Ca2+结合成螯合物,Ca2+失去凝血作用,从而防止血液凝固。EDTA-K2具有对血液标本中细胞形态和计数影响很小的优点,国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年建议将EDTA-K2作为血常规检查的抗凝剂。随着全自动血细胞分析仪的推广使用,EDTA-K已广泛应用于临床[1]。但EDTA盐会引起血小板的粘附和聚集,使自动血液分析仪无法正确识别,使血小板计数明显低于实际值。EDTA假性血小板减少是由盐引起的EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-PTCP)。对于EDTA-PTCP据国内外报道,临床发生率约为0.09%~0.21%。2011年10月至2012年4月,在血常规检测中发现3例EDTA-PTCP典型病例,现分析如下。
1材料与方法
1.1.一般数据病例1:男,46岁,因肝癌伴腹水入院;病例2:男,58岁,术后心脏癌入院化疗;病例3:女,73岁,因肺心病入院。3名患者接受常规对症治疗。
1.仪器和试剂迈瑞BC-3000全自动血细胞分析仪及迈瑞配套试剂;湖南安信医疗聚合物材料有限公司生产的真空采血管;成都迈科公司生产的快速瑞氏染液;1%草酸铵血小板稀释液和白细胞稀释液(由部门自行配制)。
1.3方法
1.3.1仪器法
1.3.1.全血模式测定分别采用EDTA-K2抗凝管和柠檬酸钠抗凝管抽取静脉血,混合均匀。根据仪器标准操作规程,测定自动血细胞分析仪的全血模式,记录PLT与WBC值。
1.3.1.2稀释血模式测定严格操作规程,准确吸收患者无名指末梢血20μl,加入仪器设定的标准量稀释液,混合静置5min稀释模式下测定后,记录PLT与WBC值。
1.3.2.根据第三版《国家临床检查操作规程》,准确吸收手指末梢血20μl加入到0.38ml草酸铵血小板稀释液充分混合,完全溶血后再混合,取血小板悬液1滴冲入计数池,静置10滴~15min之后,高倍镜计数血小板数量。用同样的方法手工计数白细胞数量。
1.3.3血涂片瑞氏染色观察分别EDTA-K2.用抗凝血和手指末梢血制作血涂片,经瑞氏染色,在油镜下观察血小板形态。2结果,3例患者入院后首次抽取静脉血进行检测。EDTA-K2.常规抗凝血检查结果PLT均低于正常值,与临床医生沟通,了解患者无出血症状,然后三名患者再次采血,分别使用不同的抗凝剂进行全血,稀释机器复查和手动计数。3名患者的结果见表1~3。
血涂片瑞氏染色结果:3例患者手指末梢血涂片中,血小板分布正常,数量多,无明显聚集现象。EDTA-K2抗凝血涂片可见血小板聚集现象或与单核细胞、淋巴细胞相互粘附和吞噬现象,也可见淋巴细胞周围血小板呈卫星现象。3分析EDTA-K2作为血细胞分析中常用的抗凝剂,具有很大的优势,但对部分患者或健康人的血小板有一定的聚集作用,导致假血小板减少。分析原因如下:(1)EDTA-K2可使血液免疫介导,产生冷抗血小板抗体,使血小板相互凝结。EDTA冷抗血小板本身的抗体也可以直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa同时,这种与血小板结合后的自身抗性Fc末端可与淋巴细胞或单核细胞膜上端Fc受体结合,出现卫星现象[2]。(2)EDTA-K2可导致血小板活化,改变血小板形态,改变血小板膜表面隐藏抗原位置,活化血小板与血浆抗体结合,激活细胞膜活化血小板纤维蛋白原受体活性物质,促进血小板和纤维蛋白原聚集组[3]。这两个原因都表现为血小板体积增大。目前,血液分析仪主要采用电阻抗法进行血细胞分类计数。血细胞是相对非导电的。悬浮在电解质溶液中的颗粒在计数孔时会引起电阻变化,从而计数和测量血细胞的体积。可见,它只是根据细胞的体积来确定的。由于EDTA-K2可引起血小板聚集或卫星现象,分析仪无法识别血小板,导致血小板计数低;当血小板聚集堆接近白细胞体积时,分析仪可作为白细胞计数,导致血小板假减少和白细胞假增加。EDTA-PTCP可见于正常人,但多数情况下伴有癌症、自身免疫性疾病、肺心病、肝病及一些原因不明的疾病。虽然发病率不高,但要注意,对于血小板减少而无出血症状的患者,一定要用不同的方法进行复查,以防误诊。对于诊断为EDTA-PTAP患者应告知以后查血常规时不要使用EDTA盐抗凝,避免不必要的检查和治疗。