一、定性检测法

免疫胶体金定性检测法主要有斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层分析(GICA)。这两种方法都具有检测速度快、简单、特异性强、灵敏度高、抗基质干扰强等优点，是一种适合基层现场筛查的快速检测方法。

1.斑点免疫金渗滤法

20世纪80年代中期，固相酶免疫检定技术开发了免疫金渗滤技术。斑点免疫金渗滤法作为一种初步筛查试验手段，反映了较高的早期诊断价值，具有良好的实用前景。李春辉等人[2]认为，在粪便隐血检测中，胶体金渗滤法的灵敏度和抗干扰能力优于邻甲苯胺法。李如林等[3]使用ELISA，流式微球载体技术(FMA)血清梅毒抗体检测与胶体金渗滤有三种不同的方法，结果表明，ELISA，FMA和DIGFA三种方法的灵敏度分别为96.00%、100%和94.00%，三种方法的特异性均为100%，表明三种方法的检测结果具有很强的一致性。

2.胶体金免疫分析法

20世纪90年代初，在免疫金渗滤技术的基础上，建立了更简单快捷的免疫层析检测技术。Marot-Leblond等[4]采用GICA阴道念珠菌检测结果敏感性100%，特异性82%，优于传统革兰染色镜检和微生物培养。方春元等[5]用胶体金早孕定性检测试验与化学发光免疫法进行比较：2.0IU以下与阴性的符合率为100%，2.0～1000.0IU与弱阳性的符合率为97.2%，1000.0IU以上与强阳性的符合率为97.5%，两者结果一致性较好。王玉金等O139胶体金免疫层析快速检测法O1139组最低检出浓度为1×105CFU/ml；与细菌培养法相比，检测184个临床标本，具有100%的特异性和灵敏度。Brunt等采用GICA大肠杆菌技术检测O157，检测限于500个细菌[7]。梁秋光等GICA鼠疫阳性检测参考血清的鼠型动物溶血清45份，结果均为阳性，间接血凝微量法照结果无法判断，表明鼠型动物溶血清45份。GICA该方法在应对溶血清方面具有很大的优势。孟芳等[9]对心脏病患者进行心肌三联检测，其灵敏度为肌红蛋白100%，肌酸肌酶同工酶96.3%，肌钙蛋白85.2%；结果表明，胶体金法心肌三联检测卡对急性心肌梗死的诊断具有良好的临床诊断价值。

二、半定量，定量检查

胶体金本身有明显的红色或粉红色，可以用肉眼和光学传感器来判断检测线(T)颜色深度，半定量，定量分析。

1.半定量检测法

早期建议硝酸纤维素膜上的显色面积与抗体浓度呈正相关[10]，建立半定量测量方法；曹丹如等[11]建立了斑点免疫金渗滤法，具有定量质量控制点，可以半定量检测尿液中的微量白蛋白。该立法符合散射免疫浊度法的结果，符合尿微量白蛋白筛查试验的临床要求。

2.定量检测法

随着胶体金免疫定量检测仪的出现，创造了一种新型的快速定量分析方法。定量分析方法的原理是基于硝酸纤维素膜上检测线(T)颜色深度与待测物浓度呈一定比例关系[12]；用光学传感器扫描试剂条，与事先制定的标准曲线进行比较，得出定量分析的结果。由于胶体金试纸条检测线的显色是一个动态过程，试纸条的生产过程、检测过程中的工作环境以及待测样品的差异都会影响动态显色的结果[13]。因此，有人提出了一种检测线(T)/质控线(C)比值定量法。T/C比值法是基于硝酸纤维素膜上的硝酸纤维素膜T，C线显色反应的影响因素基本相同。T，C线吸光值的比值可以在一定程度上消除时间、温度、待测样本等因素对试纸显色过程的影响[14]，是一种更合理的定量检测方法。谢士嘉等[15]建立的胶体金免疫层分析定量方法可准确检测样品中的金黄色葡萄球菌肠毒素B，其检出限为8ng/ml，线性范围为8~1万ng/ml。聂聪等。T/C胶体金免疫层析法对相思子毒素检测的灵敏度为30ng/ml，线性范围30~600ng/ml，敏感性与ELISA法律相似，已达到临床试验范围。

三、胶体金技术的其他应用

1.免疫电镜的应用

随着胶体金技术的不断发展，人们将其与电镜技术相结合，逐渐形成了胶体金免疫电镜技术。它具有灵敏度高、特异性强、定位准确等优点。吴淑燕等[17]建立了用胶体金标记血小板膜糖蛋白的免疫电镜技术。结果表明，使用胶体金技术可以显著提高样品的检出率，为血小板功能研究奠定基础。

2.纳米磁和核酸适配体的应用

纳米磁分离-胶体金和核酸适配体-胶体金是目前两种新型胶体金技术。纳米磁颗粒和核酸适配体作为特定的识别元件，可以将靶分子从复杂的生物系统中分离出来，浓缩样品，从而提高检测的灵敏度和检出率[18]。

3.多项联合检测技术的应用

多多联合检测技术可以同时检测各种成分，可以节省大量的检测时间和成本，具有很大的应用价值，是未来的发展方向。吴建美等[19]建立了新型胶体金免疫层分析纸条，可检测巨细胞病毒、风疹病毒、弓形虫和单纯疱疹病毒；以及ELISA与法律相比，其符合率为97.90%~100%。吴文烨等[20]建立了一种能同时检测黄曲霉毒素的方法B1、赭曲霉毒素A两种真菌毒素胶体金试纸条，两种毒素的灵敏度均可达到2.5μg/L，而且两者之间没有干扰，重复性好，稳定性好。

四，结语

免疫胶体金技术作为一种新的免疫方法，是继免疫酶标记技术、免疫荧光技术和放射免疫技术之后的第四大免疫标记技术[21]。与其他方法相比，它具有快捷方便的优点，但也存在检测结果容易受到试验环境因素的影响等不足。如血、尿等标本形成的试纸背景噪声，对仪器定量分析有明显的干扰作用[22]。此外，与其他传统检测方法相比，免疫胶体金在检出率和灵敏度上仍存在一定差异。有报道以ELISA当法律是标准时，免疫胶体金法的确定HBsAg检出率为56.76%(105/185)[23]；以电化学发光免疫分析法为标准时，检出率仅为32.00%(16/50)[24]。穆宇等[25]用于胶体金免疫分析法甲型/乙型流感快速检测试剂H1N1型流感病毒筛查的阳性预示值为40.0%，阴性预示值为95.8%；实验灵敏度为66.7%，诊断特异性为88.5%。该方法作为初步筛查实验也有一定的局限性。可见，要建立一套胶体金制备质量标准体系，保证试剂质量，提高检测稳定性。同时，将免疫胶体金与其他不同平台相结合，可使其检测技术达到新的水平，在医学检测领域得到更广泛的应用，对急诊标本或疫情现场的快速检测具有重要意义。